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蛋白質組學和代謝組學 定性蛋白質組學 蛋白全譜分析Shotgun

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???????? 蛋白全譜分析,也可稱Shotgun分析,研究對象多為完整的組織、細胞、體液等蛋白組成較為復雜的樣本或其蛋白提取物,其目的在于盡可能多的鑒定出樣本中蛋白質的種類。

??? 技術原理:蛋白全譜分析是基于“Bottum-Up”即自下而上的蛋白質質組學檢測策略,先將提取出的蛋白質利用特異性的蛋白酶消化獲得肽段混合物,依次通過色譜分離,離子化以得到不同質荷比的帶電離子,通過質量分析器將不同質荷比的肽段離子分離開來進一步采集離子的質譜圖,將實際質譜圖與理論質譜圖進行比對,從而對蛋白質進行鑒定。


適用范圍

1.?某一生理狀態下組織、細胞或者細胞器中所有表達蛋白質的鑒定;

2.?未知物種的蛋白表達譜鑒定;

3.?某一方法提純的混合蛋白鑒定。


技術優勢

?????高通量,分離能力強;

?????兼容性強,可分析蛋白質條帶、組織提取液、全細胞裂解液、亞細胞分離組分等;

?????自動化程度高。? ? ???


術流程

生信分析

送樣要求

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樣品類型?

樣品要求(/組樣品)?

備注?

蛋白質溶液?

蛋白質總量≥300μg?

重復實驗則量翻倍,建議準備兩份樣品備用。?

組織樣品?

樣品總量≥0.1g?

按照蛋白質組織提取效率(蛋白:組織=7%)?

細胞樣品?

細胞數量≥107?

胰酶消化,按細胞凍存標準離心收集細胞即可。?

體液樣品?

血清≥200μL,腦脊液≥200μL,尿液≥1mL?,淚液≥1mL.?

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論壇

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辣木的蛋白質組學分析

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Int?J?Biol?Macromol,?IF?=?3.909

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參考文獻:

Shi?Y,?Wang?X,?Huang?A.?Proteomic?analysis?and?food-grade?enzymes?of?Moringa?oleifer?Lam.?a?Lam.?flower..?[J].?Int?J?Biol?Macromol.?2018.115:883-890.?doi:?10.1016/j.ijbiomac.2018.04.109


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